Kas yra ELISA mikroplatų skaitytuvas?
Mikroplatų skaitytuvas, ty su fermentais susijęs imunosorbento tyrimas, yra speciali priemonė su fermentais susijusiam imunosorbento tyrimas. Tiesą sakant, tai yra specialus fotoelektrinis colorimetras arba spektrofotometras, o jo pagrindinis darbo principas iš esmės yra toks pat kaip pagrindinė struktūra ir fotoelektrinis colorimetras. Jis gali būti tiesiog suskirstytas į dvi kategorijas, pusiau automatines ir visiškai automatines, tačiau jų darbo principai iš esmės yra vienodi. Jo šerdis yra colorimetras, ty koloritrinis metodas naudojamas antigeno ar antikūnų kiekiui analizuoti. ELISA nustatymui paprastai reikia, kad galutinis bandymo tirpalo tūris būtų mažesnis nei 250 μL, o bandymas negali būti baigtas bendru fotoelektriniu colorimetru, todėl mikroplatės skaitytuve fotoelektriniam colorimetrui keliami specialūs reikalavimai.
Principas
Mikroplatės skaitytuvas iš tikrųjų yra specialios paskirties fotoelektrinis kolorimetras arba spektrofotometras, o jo pagrindinis darbo principas iš esmės yra toks pat kaip pagrindinė struktūra ir fotoelektrinis colorimetras. Paveikslėlyje parodytas vieno kanalo automatinio mikroplatų skaitytuvo ėmimo darbas. Schematinė diagrama. Šviesos šaltinio lempos skleidžiama šviesos banga filtro arba monochromatoriaus paverčiama monochromatine šviesa ir patenka į bandymą plastikiniame mikroporiniame poliuje. Dalis monochromatinės šviesos absorbuojama mėginyje, o kita dalis perduodama per fotodetektoriui apšviestą pavyzdį, fotodetektorius konvertuoja skirtingus mėginio šviesos signalus, kurie turi būti išbandyti į atitinkamus elektrinius signalus. Elektriniai signalai apdorojami prieš stiprinimą, logaritminį stiprinimą ir analoginį skaitmeninį konvertavimą. Įveskite mikroprocesorių duomenų apdorojimui ir skaičiavimui ir galiausiai rodykite rezultatus ekranu ir spausdintuvu. Mikroprocesorius taip pat kontroliuoja mechaninio pavaros mechanizmo judėjimą X kryptimi ir Y kryptimi, kad mikroplatė būtų perkelta per valdymo grandinę, kad būtų įgyvendintas automatinis mėginių ėmimo aptikimo procesas. Kiti mikroplatės skaitytuvai aptikimui naudoja rankinį mikro plokštelės judėjimą, todėl mechaninis pavaros mechanizmas ir valdymo grandinė X ir Y kryptimis praleidžiami, todėl prietaisas yra mažesnis ir struktūra yra paprastesnė.
Mikroplatas yra skaidri plastikinė plokštė, specialiai naudojama mėginiui išbandyti. Plokštelėje yra kelios eilės mažų vienodo dydžio skylių, o atitinkamas antigenas ar antikūnas yra įdėtas į skylę. Kiekviena maža skylė gali turėti keletą mililitrų tirpalo.
Šviesa yra elektromagnetinė banga. 100–400 m bangos ilgis vadinamas ultravioletine šviesa, žmogaus akis gali stebėti 400–780 m šviesą, o bangos ilgis, didesnis nei 780nm, vadinamas infraraudonąja šviesa. Žmonės gali matyti spalvas tik todėl, kad šviesa patenka į objektą ir atsispindi objekte. Žalieji augalai yra žali, nes dauguma augalų sugeria raudonai oranžinę šviesą ir mėlynai violetinę šviesą, tačiau jie nesugeria ir atspindi žalią, todėl augalai atrodo žali. Mikroplatės skaitytuvo matavimo principas yra aptikti analito absorbciją tam tikru bangos ilgiu.
Struktūra
Yra 40 šulinių plokštės, 55 šulinių plokštės, 96 šulinių plokštės ir pan. Skirtingi instrumentai naudoja skirtingas angų plokštes, kurias galima išbandyti po vieną arba po eilutės.
Mikroplatės skaitytuvo naudojamą monochromatinę šviesą galima gauti naudojant nuoseklų filtrą arba tą patį monochromatorių kaip spektrofotometrą. Naudojant filtrą kaip filtro įrenginį, jis yra toks pat kaip paprastas colorimetras. Jis gali būti dedamas priešais mikroplatę arba už mikroplatės. Po kondensatoriaus diafragma pasiekia atšvaitą, jį atspindi atšvaitas 90° aukštyje ir eina per kolorisinį tirpalą vertikaliai, o po to siunčiamas per filtrą. Į fotoelementą.
Iš mikroplatės skaitytuvo darbo bloko diagramos ir šviesos kelio diagramos matyti, kad jis turi šiuos skirtumus su įprastais fotoelektriniais koloritrais:
(L) Koloritrinio tirpalo inde, kurį reikia išbandyti, naudojama ne cuvette, o plastikinė mikroplatė. Mikroplatė paprastai yra pagaminta iš skaidrios polietileno medžiagos, kuri turi stiprų adsorbcijos poveikį antigenui ir antikūnams, todėl ji naudojama Jis veikia kaip kietos fazės nešiklis.
(2)Kadangi plastikinė mikroplatė, kurioje yra mėginys, yra kelių eilučių akyta, šviesa gali praeiti tik vertikaliai, todėl mikroplatės skaitytuvo šviesos spindulys praeina per bandymą turintį tirpalą ir mikroplatę vertikaliai. Šviesos spindulys gali būti iš viršaus į apačią arba Jis gali pereiti per koloritrinį skystį iš apačios į viršų.
(3) Mikroplatų skaitytuvai paprastai ne tik naudoja A, bet kartais ir naudoja optinio tankio OD, kad išreikštų absorbciją. Mikroplatų skaitytuvus galima suskirstyti į du tipus: vieno kanalo ir daugiakanalį, o vienas kanalas yra suskirstytas į du tipus: automatinį ir rankinį. Automatinis prietaiso tipas X ir Y kryptimis yra mechaninis pavaros mechanizmas, kuris gali siųsti mažas mikroplatės L skylutes po sija bandymams, o rankinis tipas matavimui naudoja mechaninį mikroplatės judėjimą.
Vieno kanalo mikroplatės skaitytuvo pagrindu buvo sukurtas daugiakanalės mikroplatės skaitytuvas. Šio tipo mikroplatų skaitytuvas paprastai yra automatizuotas. Jame nėra kelių sijų ir kelių fotodetektorių, tokių kaip 12 kanalų instrumentas su 12 sijų arba 12 šviesos šaltinių, 12 detektorių ir 12 stiprintuvų, veikiant mechaniniam pavaros įtaisui X kryptimi, 12 mėginių aptinkami iš eilės. Daugiakanalės mikroplatės skaitytuvo aptikimo greitis yra greitas, tačiau jo struktūra Sudėtingesnės kainos taip pat yra didesnės.
Mikroplatų skaitytuvo taikymo diapazonas
Hematologijos testas Su trombocitais susijęs antikūnų tyrimas PAIgA, PAIgG, PAIgM
D-Dimer D-Dimer nustatymas
Serumo fibrino skilimo produktų FDP nustatymas
T3, T4 nustatymas triiodotironinu ir tetraidotorioroninu
Imunologinis tyrimas C reaktyvus baltymų nustatymas CRP
Imunoglobulino IgD, IgE nustatymas
Cirkuliuojančių imuninių kompleksų CIC nustatymas
Reumatoidinio faktoriaus IgG, IgA, IgM RF nustatymas
Anti-tirroglobulino antikūnai, mikrosomalinių antikūnų nustatymas TG, TM
Naviko vėžio imunologinis aptikimas Alfa-fetoproteino nustatymas AFP
Karcinoembrio antigeno CEA nustatymas
Prostatos specifinio antigeno PSA nustatymas
Kasos vėžio, tulžies takų vėžio, skrandžio vėžio CA19-9 nustatymas
Kiaušidžių vėžio nustatymas CA125
Krūties vėžio nustatymas CA15-3
Gimdos kaklelio suragėjusių ląstelių karcinomos SCC nustatymas
Kelių kaulų čiulpų vėžio nustatymas
Skydliaukės vėžio hTG nustatymas
Infekcinių ligų imunologinis tyrimas, hepatito A serologinis tyrimas, anti-HAV-IgM
Hepatito B serologijos testas Dvi su puse poros
Hepatito C serologijos nustatymas Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Serologinis hepatito D anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM nustatymas
Serologinis hepatito E anti-HEV-IgG nustatymas
Antikūnų prieš hemoraginę karštligę su inkstų sindromu HFRS-IgG nustatymas
Japonijos encefalito viruso antikūnų IgM nustatymas
Žmogaus imunodeficito viruso antikūnų (t. y. regioninės AIDS) ŽIV nustatymas β 2 M
Prenatalinės ir pogimdyminės priežiūros funkcijos testas Toksoplazmos viruso testas TOXO
Raudonukės viruso aptikimas RV
Citomegaloviruso aptikimas CMV
Herpes simplex viruso anti-HSV (I., II.) nustatymas
Kiti taip pat gali atlikti genetinius tyrimus ir gyvūnų likučius, pesticidų likučių tikrinimo elementus ir kt.
